dc.contributor |
Háskóli Íslands |
dc.contributor |
University of Iceland |
dc.contributor.advisor |
Eiríkur Steingrímsson |
dc.contributor.author |
Lasseur, Romain |
dc.date.accessioned |
2024-09-11T09:11:18Z |
dc.date.available |
2024-09-11T09:11:18Z |
dc.date.issued |
2024-04 |
dc.identifier.isbn |
9789935973252 |
dc.identifier.uri |
https://hdl.handle.net/20.500.11815/4999 |
dc.description.abstract |
Establishment of melanocytes, the pigment-producing cells, starts from the multipotent
neural crest cells. Melanoblasts, the melanocyte precursor cells, follow a tight schedule
during their development requiring proliferation, migration, and invasion of the
epidermis before they form the pigment producing melanocytes. In the mouse, most
melanocytes localize to the hair bulb where they deliver melanin to the hair, which
gives mice their coat color. As melanocyte development is complex, this process
involves many regulatory proteins and transcription factors. Microphthalmia-associated
Transcription Factor (Mitf) is required for proliferation, survival and migration during
the formation of melanocytes, and has therefore been suggested as the key regulator of
their development. The role of Mitf has been largely studied in melanoma cells, but little
is known about its role in the generation of the melanocytes. In mice, mutations in Mitf
lead in most cases to the absence of melanocytes, making it difficult to observe
melanoblasts during the development in vivo. We have generated an inducible
mutation in MITF in the mouse by changing lysine in position 243 into an arginine. We
induced this mutation in melanocytes resulting in mice with alternating areas of black,
grey and white areas. This means that despite the MitfK243R mutation, some melanocytes
have grown, migrated and differentiated, while others did not (hypomorphic
phenotype), displaying heterogeneity for the fate of melanocytes during development
upon the MitfK243R mutation. We found that in these mice, fewer melanoblasts develop
and they are not able to invade the epidermis to reach the hair follicle. We generated
melanocyte primary cell lines from the mice and used those to perform in vitro studies.
The results revealed that upon activation of the MitfK243R mutation, the cells exhibited
reduced proliferation and survival. RNAseq analysis revealed genes that are
differentially regulated by MITF upon induction of the MitfK243R mutation that might
explain how this conditional mutation dysregulates the development of melanocytes. |
dc.description.abstract |
Litfrumur eru meðal frumugerða sem eiga uppruna sinn í taugakambi snemma í
þroskun hryggdýra. Forverafrumur litfruma, sem nefnast melanoblast-frumur, myndast í
taugakambi en fjölga sér áður en þær ferðast til að þekja allt yfirborð húðarinnar.
Þessar frumur fara inn í þekju húðarinnar áður en hinar eiginlegu litfrumur verða til og
hefja myndun litarefnis. Í músum enda flestar litfrumur í hársekknum þar sem þær flytja
litarefni í hárið. Þetta flókna ferli kallar á ýmis stjórnprótein og umritunarþætti. Einn
mikilvægasti umritunarþátturinn í litfrumum er MITF eða Microphthalmia-associated
Transcription Factor en hann er nauðsynlegur fyrir frumufjölgun, lifun og frumufar í
myndun litfruma. Hlutverk Mitf hefur einkum verið rannsakað í sortuæxlisfrumum en þótt
þær eigi uppruna sinn í litfrumum hafa frumurnar breyst við æxlismyndunina og því
ekki ljóst að hið sama eigi við í litfrumunum eða forverum þeirra. Stökkbreytingar í Mitf
geni músa leiða oftast til þess að litfrumurnar og forvera þeirra vantar alveg og því
hefur reynst erfitt að skilgreina in vivo hlutverk gensins í hinum ýmsu skrefum
litfrumuþroskunar.
Hér lýsum við skilyrtri stökkbreytingu í Mitf geni músar þar sem táknanum fyrir
amínósýru 243 er breytt úr lýsin í arginín. Þegar þessi breyting var kölluð fram í
litfrumum urðu einungis til mýs með mislit svæði þar sem skiptust á svört, grá og hvít
svæði. Þrátt fyrir MitfK243R stökkbreytinguna hafa einhverjar starfhæfar litfrumur orðið til
(svört svæði), einhverjar eru vanstarfhæfar (grá svæði) og enn aðrar eru óstarfhæfar
eða vantar alveg (hvít svæði). Með því að rekja litfrumurnar í þroskun sýndum við að
mun færri litfrumur verða til og íferð þeirra inn í þekjuna gerist sjaldnar. Frumulínur
voru útbúnar úr litfrumum músanna og notaðar til að skoða áhrif stökkbreytingarinnar in
vitro. Niðurstöðurnar sýna að þegar MitfK243R stökkbreytingin er virkjuð í frumulínunum
fækkar frumuskiptingum og lifun frumanna minnkar. Raðgreining RNA sameinda sýndi
að stökkbreytingin hefur sértæk áhrif á tjáningu markgena og að þau áhrif útskýra að
hluta áhrif stökkbreytingarinnar á þroskun litfruma. |
dc.language.iso |
en |
dc.publisher |
University of Iceland, School of Health Sciences, Faculty of Medicine |
dc.rights |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
dc.subject |
Doktorsritgerðir |
dc.subject |
Litfrumur |
dc.subject |
MITF |
dc.subject |
Melanocyte |
dc.subject |
Development |
dc.subject |
Mosaicism |
dc.subject |
Transcription regulation |
dc.title |
Role of Mitf in melanocyte development as determined by a conditional hypomorphic mutation |
dc.title.alternative |
Áhrif skilyrtrar stökkbreytingar í Mitf geni músar á þroskun og starfsemi litfruma |
dc.type |
info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
dc.contributor.department |
Læknadeild (HÍ) |
dc.contributor.department |
Faculty of Medicine (UI) |
dc.contributor.school |
Heilbrigðisvísindasvið (HÍ) |
dc.contributor.school |
School of Health Sciences (UI) |